【产品编号】LXC003M/L
【产品名称】LbCas12a蛋白
【预期用途】用于基于CRISPR技术平台的检测类产品开发
【包装规格】500pmol/2000pmol
【产品内容】
需准备的其他试剂：
1)探针：可搭配我司的荧光探针进行荧光法实时检测；也可搭配胶体金探针及配套试纸条，进行胶体金法检测。
2)gRNA：采用CRISPR/Cas12a的gRNA设计方法设计，也可使用gRNA在线设计工具。
【检测原理】
LbCas12a（又称Cpf1），属于2类V型CRISPR效应蛋白，是在单链向导RNA引导下与靶DNA特定位点结合并切割的核酸内切酶，目前已经广泛应用于微生物、植物和动物的基因编辑中，并在分子诊断方面具有非常大的应用前景。
LbCas12a识别并切割靶标双链DNA（反应底物）的同时，其高效切割任意序列单链DNA(ssDNA)的活性被激活。通过设计两端带荧光标记或其他小分子标记的探针，实现CRISPR/Cas12a对DNA检测的信号放大，常用的检测方法包括实时荧光法和胶体金法。由于gRNA特异性识别靶区域，CRISPR/Cas12a系统相当于对待分析的DNA或DNA扩增产物进行了『二次筛选』，因此具有较高的特异性。
【储存条件及有效期】
本产品于-20℃密封保存，有效期12个月。建议分装后保存，尽量避免反复冻融。
【适用仪器】
如使用荧光法，推荐使用全功能酶标仪，qPCR仪。
【检验步骤】
1反应底物制备：
反应底物可为RPA、LAMP、PCR等方法的核酸扩增产物。
2推荐反应体系：
反应前将体系混匀，每10min读取一次荧光数值，时间30 min~2h。
3结果分析
3.1荧光法检测结果分析
示例如下图，阴性反应曲线接近平行于X轴，强阳性反应曲线在10-15 min到达平台期。
【注意事项】
1. 本产品仅供科研使用，使用前请仔细阅读本说明书。
2. 请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行实验操作，注意防止扩增产物污染。
3. 实验结束后，检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。
