【产品编号】LXC007M/L
【产品名称】LwaCas13a蛋白
【预期用途】用于基于CRISPR技术平台的检测类产品开发
【包装规格】500pmol/2000pmol
【产品内容】
需准备的其他试剂：
1)探针：可搭配我司的荧光探针进行荧光法实时检测；也可搭配胶体金探针及配套试纸条，进行胶体金法检测。
2)gRNA：采用CRISPR/Cas13a的gRNA设计方法设计，也可使用gRNA在线设计工具。
【检测原理】
Cas13属于Ⅱ类Ⅵ型CRISPR系统效应蛋白，含有2个高等真核生物和原核生物核苷酸结合(higher eukaryotes and prokaryotes nucleotide-binding, HEPN）结合域，随后被证实为是一种RNA靶向剪切的新型CRISPR蛋白酶。Cas13在向导RNA引导下识别并切割靶标RNA时，其“附属切割”活性被激活，可高效切割体系中非特异单链RNA(ssRNA)。通过设计两端标记荧光基团或者其他标记物的RNA探针，可实现CRISPR/Cas13对RNA模板的检测和信号放大。常用的检测方法包括实时荧光法和胶体金层析法。该系统灵敏度高，特异性强，已经广泛应用于微生物、植物和动物的基因编辑中，并在分子诊断方面具有非常大的实际应用价值。
【储存条件及有效期】
本产品于-20℃密封保存，有效期12个月。建议分装后保存，尽量避免反复冻融。
【适用仪器】
如使用荧光法，推荐使用全功能酶标仪，qPCR仪。
【检验步骤】
1 反应底物制备：
反应底物可为RPA、LAMP、PCR等方法的核酸扩增产物。
2 推荐反应体系：
反应前将体系混匀。设置反应温度37℃，每10 min读取一次荧光数值，时间30 min~1h。
3结果分析
CRISPR/Cas反应结果，阴阳性判断如下图所示。
【注意事项】
1. 本产品仅供科研使用，使用前请仔细阅读本说明书。
2. 请严格按照基因扩增实验室的管理规范进行实验操作，注意防止扩增产物污染。
3. 实验结束后，检测过程中所产生的废弃物应按照相关规范进行处理。
